«15» апреля 1952 года первый полёт совершил второй прототип B-52 (серийный номер 49-231) по маршруту Renton Field Рентон (штат Вашингтон) — авиабаза «Ларсон». Полёт продолжался 2 часа 21 минуту. Самолёт пилотировали тест-пилот фирмы Боинг Элвин Джонстон и подполковник ВВС США Guy M. Townsend.